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荧光显微镜 内容简介 荧光显微镜简介 荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。用于研究细胞内物质的吸收、运输···
荧光显微镜
荧光显微镜简介
荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性研究的工具之一。
前处理方法 live/dead染色(Calcein-AM/PI双染):
1 根据您的需求处理细胞
2. 根据试剂盒要求配制染色工作液
3. 收集样本细胞,细胞数量在 1X106 个以内。
4.用 PBS 洗涤细胞两次。
5.用 200ul 染色工作液将细胞重悬。
6.4°C避光孵育 15-30 分钟。
7.用 PBS 洗涤细胞。
8.用适量 PBS 重悬细胞。
9.用荧光显微镜或流式细胞仪检测结果。染料-DNA 复合物的最大激发 490±10nm,最大发 射波长分别为 515nm 和 617nm。
荧光显微镜下,使用 490±10nm 波长激发,活细胞为黄绿色,死细胞为红色。
图1 图2
图1 是MC3T3-E1细胞骨架染色,图2是NIH3T3live/dead染色。
需要您提供:
1.直接拍摄的片子(直接上机拍摄)
2.原材料(含前处理方案+制片信息)
可以直接拍摄也可以委托做前处理,请指出前处理方案和步骤,以细胞活力检测前处理为列(平台也可以委托购买试剂盒和细胞等生物材料):
仪器型号为leica DMI8,拍摄5-6张照片。